清創(chuàng)生液體敷料抑菌活性的研究

馬敏，楊朝雪，張春陽(yáng)，侯法利，范建立

(河南承東生物科技有限公司。河南鄭州)

摘要:目的：研究清創(chuàng)生的抑菌活性。

方法：將大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌培養(yǎng)24h后，用0.9%NaC1溶液制成適宜濃度的菌懸液，取適量菌懸液與清創(chuàng)生樣品進(jìn)行作用，將作用后的混合液進(jìn)行稀釋，取適量稀釋液涂于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。

結(jié)果：清創(chuàng)生對(duì)5種測(cè)試菌均有較強(qiáng)的抑制作用。

結(jié)論：清創(chuàng)生具有廣譜的抗菌活性，作用機(jī)理為吸附微生物細(xì)胞過程中能夠和細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)及細(xì)胞膜的生物酶系統(tǒng)發(fā)生作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

關(guān)鍵詞:清創(chuàng)生;液體教料;抑菌活性

中圖分類號(hào): R941.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A    DOL: 10.3969/j.issn. 1671-3141.2020.77.051

　　本文引用格式:馬敏，楊朝雪，張春陽(yáng)，等，清創(chuàng)生液體教料抑菌活性的研究，世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2020,20(77),97-98

0　引言

　　清創(chuàng)生產(chǎn)品為本公司自主研發(fā)的一款針對(duì)表面創(chuàng)傷的液體敷料。創(chuàng)傷主要包括皮膚和黏膜創(chuàng)面損傷，常見的人體皮膚損傷有燒燙傷、急慢性潰瘍、機(jī)械劃傷、手術(shù)傷口等。清創(chuàng)生含有陽(yáng)離子表面活性劑一奧替尼啶,已被多個(gè)歐洲國(guó)家批準(zhǔn)作為皮膚、粘膜和傷口的抗菌劑，其不會(huì)對(duì)人體上皮和傷口組織產(chǎn)生不利影響[1],使用起來(lái)更安全，擴(kuò)大了清創(chuàng)生的應(yīng)用范圍，在口腔!科、皮膚科外科等多個(gè)科室均可使用。本研究對(duì)清創(chuàng)生的抑菌活性進(jìn)行了研究，報(bào)告如下。

1　儀器與材料

1.1 儀器

       FA2004電子天平，上海津平設(shè)備儀器有限公司;XFH-30CA電熱式壓力蒸汽滅菌鍋,浙江新豐醫(yī)療器械有限公司;BC-1001112 -X生物安全柜，濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司;SHP- -80生化培養(yǎng)箱,北京中興偉業(yè)儀器有限公司;XK96-A快速混勻器,江蘇新康醫(yī)療器械有限公司。

1.2 材料

　　胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA )、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA )均購(gòu)自北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

　　大腸埃希菌[CMCC(B)44102]、金黃色葡萄球菌[CMCC (B)260031]、白色念珠菌[CMCC (F )98001]來(lái)源于北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司;銅綠假單胞菌[CMCC (B)10104]、枯草芽孢[CMCC(B)63501]來(lái)源于上海魯微科技有限公司。

2方法

2.1　菌液的制備

　　取適量經(jīng)34 ℃培養(yǎng)24 h的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌培養(yǎng)物接人1mL 0.9%無(wú)菌NaCl溶液(以下簡(jiǎn)稱溶劑)中,用溶劑繼續(xù)稀釋100倍，制成5105 ~4.5106 efu/mL的菌液，備用。

2.2 菌液與樣品作用

　　取樣品5 mL和對(duì)照液(無(wú)菌水)5 mL各5瓶,取上述制備好的菌液，分別在每個(gè)樣品和對(duì)照液中滴加100μL,均勻混合,開始計(jì)時(shí),作用20 min。

2.3　作用后菌液的稀釋與涂布

　　將作用后的菌液用無(wú)菌水進(jìn)行稀釋，分別取稀釋后的菌液0.25mL,均勻涂布在TSA(大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌)或SDA(白色念珠菌)平板上。TSA平板置于34 ℃培養(yǎng)2 d, SDA平板置于25 ℃培養(yǎng)3 d,對(duì)菌落計(jì)數(shù)并計(jì)算抑菌率。

2.4　計(jì)算抑菌率　 對(duì)照組平均菌落數(shù)-供試品組平均菌落數(shù)　 x 100%

                 對(duì)照組平均菌落數(shù)

　　抑菌率為50% ~90%，產(chǎn)品有抑菌作用;抑菌率≥90%，產(chǎn)品有較強(qiáng)的抑菌作用。

3、結(jié)果

　　表1顯示，清創(chuàng)生組與對(duì)照組相比較，清創(chuàng)生對(duì)大腸埃希菌的抑菌率>99.9%，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌率>99.9%，對(duì)銅綠假單胞菌的抑菌率>99.9%，對(duì)枯草芽孢桿菌的抑菌率>99.9%，對(duì)白色念珠菌>99.9%，說(shuō)明清創(chuàng)生對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌均有較強(qiáng)的抑菌作用。

3、討論

　　清創(chuàng)生通過在創(chuàng)面表面形成保護(hù)層，起物理屏障作用，對(duì)創(chuàng)面有直接的表面性作用。清創(chuàng)生含有一種新型的陽(yáng)離子表面活性劑-奧替尼啶，是用于皮膚、粘膜和傷口的特殊凈化劑。研究表明，奧替尼啶對(duì)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)具有較強(qiáng)的吸附和相互作用，從而對(duì)G*菌、G菌、衣原體、支原體和真菌均有較強(qiáng)的抗菌作用[2-5]。Assadian o等在傷口護(hù)理雜志:奧替尼啶的生物學(xué)特性和臨床功效中研究表明，奧替尼啶在pH值1.6~12.2,分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，抗菌效果不受傷口pH變化影響[6]。本研究結(jié)果表明清創(chuàng)生對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌均有較強(qiáng)的抑菌性活性。

　　綜上所述，清創(chuàng)生具有廣譜的抗菌活性，其作用機(jī)理:吸附微生物細(xì)胞過程中能夠和細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)及細(xì)胞膜的生物酶系統(tǒng)發(fā)生作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

參考文獻(xiàn)

[1]Eisenbeiss W, Siemers F, Amtsberg G, et al. Prospective, double blinded,randomised controlled trial sssing the ffect of an Octenidine - basedhydrogel on bacterial colonisation and epithelialization of skin graft wounds inburm paticnts.Int J Burms Trauma,2012,2(2):71-79.

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部GB/T15979-2002一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S] 北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2002

[3] Koburger T, Hübner NO, Braun M, ct al. Standardized comparison of antiseptic efficacy of triclosan, PVP - iodine, octenidine dihydrochlonide,polyhexanide and chlorhexidine digluconate[J] Journal of Antimicrobial Chemotherapy,2010,65(8):1712-1719.

[4]Kramer A, Müller G. Microbicidal efficacy, further biological activities,tolerance and biodegradation of octenidine dihydrochloride[J].GMS Krankenhaushygiene Interdisziplin?r,2007,2(2):Doc49.

[5] NN Malinovskil, Rcsbetmikov EA, Rubashnaia IE, et al. Antiseptics on the base of Octenidine Hydrochloride[J] Khirurgiia,1997,66(8):8-10

[6]Assadian O, H?mmerle G, Lahnstcinetr E, et al. Facilitating wound bedpreparation: propertics and clinical efficacy of octenidine and octenidine-based products in modern wound management[J] Journal of WoundCare,2016.25(Sup3):S1-S27.